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　　膀胱癌（Bladder cancer，BLCA）是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一，BLCA的肿瘤微环境具有明显的异质性。尽管在免疫检查点阻断、新辅助化疗和靶向治疗方面取得了可喜的进展，但晚期BLCA预后仍然很差。描述肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）的异质性和功能特征，有助于实现BLCA精准治疗。虽然经典分子亚型有效反映了TME的异质性和特征，但在临床应用中仍受到一些限制。因此，开发更加可靠的治疗反应预测生物标志物以实现精准医疗仍然具有挑战性。

　　大多数5mC调控子相关基因在肿瘤细胞上显著高表达，例如DNMT3A、MBD1、MBD3、UNG、NEIL1、ZBTB33、NTHL1、SMUG1、TDG、UHRF1、TET1、TET2和TET3（图2）。6个5mC调控子相关基因，包括DNMT1、MECP2、MBD2、ZBTB38、MBD4和UHRF1，在癌细胞和非恶性细胞中均有表达。尽管如此，5mC调控子相关基因阳性细胞的比例在癌细胞类型中最高。此外，在公开BLCA单细胞数据集（GSE145137）中也观察到类似结果。

　　5mC cluster1分子亚型的高评分预示管腔亚型和非炎症表型，特点是抗癌免疫力较低，但预后较好。此外，发现5mC cluster 1分子亚型的高评分预示着，患者对癌症免疫疗法、新辅助化疗和放疗的敏感性低，但对抗血管生成疗法和靶向疗法的有较高的敏感性。最后，作者对5mC评分进行了泛癌种分析，在胸腺瘤、低级别胶质瘤和肾透明细胞癌中5mC评分与四个关键免疫检查点PD-L1、PD-1、CTLA-4和LAG-3的表达呈负相关。5mC评分反映了TME的许多生物学特征，例如抗癌免疫、免疫原性和癌症干性，表明5mC评分可能是癌症预后和免疫检查点反应的普遍预测标志物。